ફ્લોરોસીનથી માઈક્રોસ્કોપી: પદ્ધતિ સિદ્ધાંતો

શોષણ અને પ્રકાશ વધુ અકાર્બનિક અને કાર્બનિક પ્રવાહી પુનઃ સ્ત્રાવ સ્ફુરદીપ્તિ અંધારામાં મંદ પ્રકાશ અથવા ફ્લોરોસીનથી પરિણામ છે. ઘટના વચ્ચે તફાવત શોષણ અને પ્રકાશ પ્રવાહ પ્રદૂષણ વચ્ચેનો અંતરાલ સમયગાળો છે. આ બધી પ્રક્રિયાઓના કારણે ફ્લોરોસીનથી લગભગ એકસાથે જ જોવા મળે, ત્યારે સ્ફુરદીપ્તિ અંધારામાં મંદ પ્રકાશ, - કેટલાક વિલંબ સાથે.

ઐતિહાસિક માહિતી

1852 માં, બ્રિટીશ વિજ્ઞાની સ્ટોક્સે, પ્રથમ ફ્લોરોસીનથી વર્ણવી હતી. તેમણે પ્રયોગો પરિણામે નવી ટર્મ પરિચય fluorspar, જે અલ્ટ્રાવાયોલેટ પ્રકાશ હેઠળ લાલ પ્રકાશ ફેંકે છે. સ્ટોક્સે એક રસપ્રદ ઘટના નોંધ્યું હતું. એવું જાણવા મળ્યું છે કે ફ્લોરોસન્ટ કિરણોત્સર્ગ તરંગલંબાઇ હંમેશા ઉત્તેજન પ્રકાશ પ્રવાહ કરતા વધારે છે.

19 મી સદીમાં પૂર્વધારણા ખાતરી કરવા માટે ત્યાં ઘણા પ્રયોગ કરવામાં આવી રહ્યો છે. તેઓ દર્શાવે છે કે નમૂનાઓ વિવિધ અલ્ટ્રાવાયોલેટ પ્રકાશ પ્રભાવ હેઠળ પ્રતિદિપ્ત. સામગ્રી વચ્ચે, અન્ય વસ્તુઓ કરવામાં સ્ફટિકો, રાળ, ખનિજો, હરિતદ્રવ્ય, ક્રુડ દવાઓ, ઇનઓર્ગેનિક સંયોજનો, વિટામિન્સ, તેલ સમાવેશ થાય છે. જૈવિક પરીક્ષણ માટે રંગોનો સીધી ઉપયોગ માટે જ 1930 માં શરૂ થયો હતો

ફ્લોરોસીનથી માઈક્રોસ્કોપી: વર્ણન

20 મી સદીના અભ્યાસ પ્રથમ અર્ધમાં વપરાતા પદાર્થની કેટલાક ઉચ્ચ વિશિષ્ટતા પ્રદર્શન કર્યું હતું. стал важнейшим инструментом и в биомедицинских, и в биологических исследованиях. કામગીરી, કે જે પદ્ધતિઓ વિરોધાભાસથી દ્વારા પ્રાપ્ત કરી શકાઈ નથી માટે આભાર, ફ્લોરોસીનથી માઈક્રોસ્કોપી પદ્ધતિ બાયોમેડિકલ અને જૈવિક સંશોધન એક આવશ્યક સાધન બની ગયું છે. એ જ રીતે મહત્વપૂર્ણ પરિણામો મેળવી છે, અને સામગ્રી માટે આવ્યા હતા.

? શું ફાયદા ફ્લોરોસીનથી માઈક્રોસ્કોપી પદ્ધતિ કરે છે? નવી સામગ્રી મદદથી શક્ય બન્યુ છે અને અત્યંત ચોક્કસ સેલ submicroscopic ઘટકોની પસંદગી. ફ્લોરોસીનથી માઈક્રોસ્કોપી એક અણુ શોધી શકે છે. ડાયઝનો વિવિધ એક જ સમયે એકસાથે અનેક વસ્તુઓની ઓળખ પરવાનગી આપે છે. સાધનો, જે બદલામાં, નમૂનો ચોક્કસ ગુણધર્મો પર આધાર રાખે છે વિવર્તનને મર્યાદા મર્યાદિત અવકાશી ઠરાવ હોવા છતાં, આ સ્તરની નીચે પરમાણુઓ ઓળખ પણ તદ્દન શક્ય છે. ઇરેડિયેશન પ્રદર્શન autofluorescence પછી વિવિધ નમૂનાઓ. આ ઘટના વ્યાપક શૈલશાસ્ત્ર, વનસ્પતિશાસ્ત્ર, સેમિકન્ડક્ટર ઉદ્યોગમાં ઉપયોગ થાય છે.

લક્ષણો

પ્રાણીઓની પેશીઓમાં અથવા જીવાણુઓ વારંવાર જટિલ અથવા ખૂબ નબળા અથવા ખૂબ મજબૂત નિશ્ચિત autofluorescence અભ્યાસ કરે છે. જોકે, અભ્યાસ કિંમત સામગ્રી ઘટકો ચોક્કસ તરંગોલંબાઇ પર ઉશ્કેરાયેલા કે પરિચય અને જરૂરી પ્રકાશ ફ્લો તીવ્રતા સ્ત્રાવ પ્રાપ્ત કરે છે. Fluorochromes સ્વતંત્ર રીતે સક્ષમ રંગોનો માળખાં (દૃશ્યમાન અથવા અદ્રશ્ય) સાથે જોડાયેલ કારણ કે કામ કરે છે. આમ તેઓ લક્ષ્યાંકને ઊંચી પસંદગી, અને પરિમાણ ઉપજ છે.

стала широко применяться с появлением естественных и синтетических красителей. ફ્લોરોસીનથી માઈક્રોસ્કોપી વ્યાપક કુદરતી અને કૃત્રિમ ડાયઝનો આગમન થી કરવામાં આવે છે. તેઓ સ્ત્રાવ અને ઉત્તેજન ચોક્કસ તીવ્રતા પ્રોફાઇલ્સ ધરાવે છે અને ચોક્કસ જૈવિક લક્ષ્યાંકોનું લક્ષ્યાંક બનાવ્યો હતો.

એકાંગી ઓળખ

ઘણી વખત, આદર્શ પરિસ્થિતિમાં, તમે એક અલગ તત્વ ગ્લો નોંધાવી શકો છો. આ માટે, અન્ય વસ્તુઓ વચ્ચે, તે જરૂરી ડિટેક્ટર અને ઓપ્ટિકલ પૃષ્ઠભૂમિ પુરતા નીચા અવાજ પૂરો પાડવાનો છે. કારણે સ્રાવ કાઢી શકે છે અપ કરવા માટે 300 હજાર. ફોટોન photobleaching નિષ્ફળતા માટે Fluorescein પરમાણુ. પ્રક્રિયા 20% સંગ્રહ કાર્યક્ષમતા પર અને તેમને લગભગ 60 હજાર એક રકમ નોંધાવી શકો છો.

, основанная на лавинных фотодиодах или электронном умножении, позволяла исследователям наблюдать поведение отдельных молекул на протяжении секунд, а в ряде случаев и минут. હિમપ્રપાત photodiodes અથવા ઇલેક્ટ્રોનિક ગુણાકાર પર આધારિત ફ્લોરોસીનથી માઈક્રોસ્કોપી, સંશોધકો બીજા મારફતે એકાંગી વર્તન અવલોકન કરવાની પરવાનગી આપે છે, અને કેટલાક કિસ્સાઓમાં પણ મિનિટ.

જટિલતા

ઓપ્ટિકલ અવાજ પૃષ્ઠભૂમિ દમન તરફેણમાં કી મુદ્દો. હકીકત એ છે કે ફિલ્ટર્સ અને લેન્સ કેટલાક autofluorescence પ્રદર્શન ડિઝાઇન ઉપયોગમાં સામગ્રી ઘણા પ્રારંભિક તબક્કામાં વૈજ્ઞાનિકો પ્રયાસો ઓછી ફ્લોરોસીનથી કર્યા ઘટકો ઉત્પાદન માટે લક્ષી હતા કારણે છે. જોકે, ત્યારપછી પ્રયોગો નવા તારણો તરફ દોરી ગયા. , основанная на полном внутреннем отражении, позволяет достичь низкого фона и высокоинтенсивного возбуждающего светового потока. ખાસ કરીને, તે જાણવા મળ્યું હતું કે ફ્લોરોસીનથી માઈક્રોસ્કોપી, સંપૂર્ણ આંતરિક પ્રતિબિંબને આધારે, તેને ઓછી પૃષ્ઠભૂમિ અને ઉચ્ચ તીવ્રતા ઉત્તેજન પ્રકાશ પ્રાપ્ત કરવા માટે પરવાનગી આપે છે.

મેકેનિઝમ

, основанной на полном внутреннем отражении, заключаются в использовании быстрозатухающей или нераспространяющейся волны. ફ્લોરોસીનથી માઈક્રોસ્કોપી સિદ્ધાંતો સંપૂર્ણ આંતરિક પ્રતિબિંબને પર આધારિત અલોપ થઈ જતું વેવ અથવા અલોપ થઈ જતું ઉપયોગ છે. તે અલગ સાથે મીડિયા વચ્ચેની સીમા જોવા મળે રેફ્રાકિટવ સૂચકાંકો. આ કિસ્સામાં, પ્રકાશ બીમ પ્રિઝમ પસાર થાય છે. તે એક ઉચ્ચ પીરોજની પ્રત્યાવર્તન સૂચિ પરિમાણ છે.

પ્રિઝમ નીચા પરિમાણ સાથે જલીય દ્રાવણમાંથી અથવા કાચના અડીને. કોણ કે જે વધુ જટિલ છે તે દિગ્દર્શન પ્રકાશ બીમ તો, બીમના તદ્દન ઈન્ટરફેસ થી પ્રતિબિંબિત થાય છે. આ ઘટના, બદલામાં, nonpropagating મોજા ઉત્પન્ન થાય છે. બીજા શબ્દોમાં કહીએ તો, તો જનરેટ ઇલેક્ટ્રોમેગ્નેટિક ક્ષેત્ર કે જે અંતર 200 કરતા ઓછા નેનોમીટર પર એક નીચલા પીરોજની પ્રત્યાવર્તન સૂચિ પરિમાણ સાથે માધ્યમ ઘૂસી જાય છે.

અલોપ થઈ જતું તરંગ પ્રકાશની તીવ્રતા fluorophores ઉત્તેજિત કરવા માટે પૂરતી હશે. જોકે, તેના અત્યંત નાના ઊંડાઈ કારણે, તેના વોલ્યુમ ખૂબ જ નાના હશે. પરિણામ એક નિમ્ન-સ્તર પૃષ્ઠભૂમિ છે.

ફેરફાર

ફ્લોરોસીનથી માઈક્રોસ્કોપી સંપૂર્ણ આંતરિક પ્રતિબિંબને પર આધારિત છે, એપી પડતો પ્રકાશ સાથે અમલ કરી શકાય છે. આ ઉચ્ચ સંખ્યાત્મક છિદ્ર સાથે લેન્સ જરૂરી (ઓછામાં ઓછા 1.4, પરંતુ તે ઇચ્છનીય છે કે તે 1.45-1.6 સુધી પહોંચી છે), અને આંશિક ક્ષેત્ર ઉપકરણ ઝળહળી ઉઠે છે. બાદમાં એક નાના હાજર કદ સાથે પ્રાપ્ત થાય છે. વધારે એકરૂપતા એક પાતળા રિંગ, જે પ્રવાહ એક ભાગ દ્વારા અવરોધિત કરવામાં આવી છે ઉપયોગ કરે છે. જટિલ કોણ, જે પછી ત્યાં કુલ પ્રતિબિંબ છે, અમે લેન્સ નિમજ્જન મધ્યમ અને સૂક્ષ્મદર્શક યંત્ર કવર કાચની વક્રીભવન ઊંચા સ્તર જરૂર છે.